Orientação do Prof. Dr. Édimo Fernando Alves Moreira.

Dissertação (Mestrado)- Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Triângulo Mineiro, Campus Uberaba, 2024.

Inclui bibliografia

A soja (Glycine max L.) é uma cultura amplamente utilizada na agricultura em todo o mundo e a incidência de pragas é um dos fatores limitantes para seu cultivo, sendo empregados nos cultivos de híbridos transgênicos resistente à insetos. A Cry1AC de Bacillus thuringiensis (Bt), é uma proteína...

A soja (Glycine max L.) é uma cultura amplamente utilizada na agricultura em todo o mundo e a incidência de pragas é um dos fatores limitantes para seu cultivo, sendo empregados nos cultivos de híbridos transgênicos resistente à insetos. A Cry1AC de Bacillus thuringiensis (Bt), é uma proteína expressa em plantas transgênicas de soja com ação inseticida. A detecção da expressão de genes transgênicos pode ser realizada utilizando várias técnicas laboratoriais avançadas incluindo o teste de ELISA. O Elisa tem a capacidade de detectar a presença do antígeno através de anticorpos de captura e de detecção. Neste trabalho, um protocolo de ELISA foi otimizado para detectar a proteína Cry1Ac em sementes de soja. As sementes foram esmagadas e adicionada solução de extração para o DNA. Para montagem das placas de Elisa, foram testadas as concentrações de 1,88 ug/mL e 7,5 ug/mL de anticorpos de captura e as diluições de 1/3200 e 1/800 de anticorpos de detecção, avaliados em cada etapa do teste. Os resultados obtidos mostraram que podemos otimizar o teste com especificidade e sensibilidade, utilizando-se a concentração de 1,88 ug/mL de anticorpo de captura; ou, reduzindo o tempo de teste considerando a eliminação da etapa de bloqueio e a incubação do anticorpo de detecção junto a amostra a 7,5 ug/mL de anticorpo de captura.

Palavras-chave: pragas; transgênicos; bacillus thuringiensis; híbridos